核酸实验不稳定？可能是酶在“作祟”

01 DNase与RNase特性与来

DNase和RNase是分别特异性降解DNA和RNA的水解酶。它们通过切断核酸分子中的磷酸二酯键使核酸链断裂，导致降解。RNase因其二硫键结构而具有极高的稳定性，能够抵抗高温煮沸甚至变性剂，在失活后还可重新折叠恢复活性，这使得它成为RNA相关实验的头号天敌。污染来源主要分为两大类：

✅ 实验人员：皮肤、汗液、唾液（飞沫）和头发均含有大量核酸酶。
✅ 实验器材：移液器、吸头、离心管、玻璃器皿、实验台面及仪器按键等若未妥善处理，极易附着核酸酶。
✅ 试剂与水：普通蒸馏水或去离子水以及化学试剂在生产储存过程中可能受到污染。
✅ 空气中灰尘微粒：可携带核酸酶落入开放放置的试剂或样本中。

✅ 内源性污染是指样本自身携带的核酸酶，所有生物组织和细胞样品均含有内源性核酸酶。一旦样本离开活体或其原有生长环境，内源酶便会开始降解RNA/DNA。降解速度取决于内源酶含量和所处环境温度。例如，肝脏、胰腺、脾脏、胸腺、脑组织以及植物组织等均含有丰富的内源核酸酶，若处理不当，核酸会迅速降解。

针对这些潜在风险，选择可靠的无酶耗材是防控污染的第一步。爱津生物所有产品——从离心管、吸头、深孔板到PCR板、细胞培养系列等均在十万级无尘车间内生产制造，出厂前经严格检测，确保无DNase/RNase污染、无热原、无PCR抑制剂。让科研人员能够安心专注于实验本身，而非担忧外源风险。

02 建立无DNase无RNase实验环境

尽可能设立用于RNA/DNA操作的专用超净工作台或区域。定期使用核酸酶清除剂擦拭台面和仪器表面。这些清除剂能有效使核酸酶失活，且通常无毒无腐蚀性，使用后需用无酶水擦拭去除残留。

玻璃与金属器皿，可通过干烤灭菌法，或使用核酸酶清除剂处理，后者更为便捷安全。

优先选购商业化的、无DNase/RNase的耗材，开包即用，更加可靠安全。

爱津生物所有耗材产品均通过ISO13485质量管理体系和CE认证，生产基地面积达26000㎡，配备5500㎡十万级、500㎡万级无尘车间，严格按照标准流程生产与质控，可为实验人员提供真正“开包即用”的无酶耗材保障。

实验前佩戴干净的无粉手套和口罩。接触任何潜在污染源（如门把手、电话、自己的皮肤或头发）后应立即更换手套，操作RNA样本时尽量避免说话。

在所有涉及试剂的步骤中最好都选用带滤芯的吸头，其高效过滤和强疏水性可有效防止气溶胶污染移液器内部，避免交叉污染。

任何时候怀疑有污染可能，应立即更换手套、离心管及吸头。将试剂进行小份分装，每次实验使用单独的分装瓶，避免反复取用导致整瓶试剂被污染。

针对内源性污染，关键在于快速有效地抑制样本中核酸酶的活性。

“ 样本的快速处理与妥善保存 ”

样本采集后应尽快处理。若无法立即提取核酸，必须采取快速冷冻措施（如直接投入液氮），以最大限度地减少RNA/DNA的降解。对于组织样本，液氮碾磨是破碎组织并同步抑制内源酶最有效的方法。

有效保护样本RNA不被内源酶降解，如RNAlater等。

在核酸提取阶段，应使用能迅速灭活内源核酸酶的裂解液。对于内源酶含量高的组织（如肝脏、胰腺、植物组织等），推荐使用含苯酚的裂解液，以增强灭活能力。电动匀浆器与液氮碾磨配合使用，能确保组织细胞被快速、彻底地匀浆，使裂解液中的有效成分立即抑制住细胞内核酸酶。

爱津生物提供多种规格离心管及储液耗材，为不同样本类型提供匹配解决方案，从样本处理到核酸提取全程防污染。

建议选用无DNase/RNase的试剂和超纯水。

对于自配试剂，务必使用无酶水和经过处理的器皿配制。

爱津生物所有耗材均无DNase/RNase污染、无热原、无PCR抑制剂，可放心用于高灵敏核酸实验。

03 无DNase/RNase环境检验

定期检验实验室无DNase/RNase环境，同样关键。

用待验证的水或缓冲液孵育一段完整的RNA或DNA标准片段，一段时间后通过琼脂糖凝胶电泳观察。

条带清晰表明无污染，出现拖尾或条带消失则表明存在降解。

使用商品化的高灵敏度荧光底物检测试剂盒，可以快速、定量地检测出极微量的RNase或DNase活性，有助于精准定位污染源。

04 核酸酶污染应急处理

一旦怀疑或确认核酸酶污染：

丢弃可能污染的吸头、离心管等实验室耗材，启用新批次试剂。

使用专用核酸清除剂擦拭台面、仪器，并对实验区域进行紫外线照射。

爱津生物的耗材产品系列覆盖900余种，包括深孔板、移液吸头、管柱类、储液槽、PCR系列、细胞培养类等，全面满足不同实验场景的无酶防控需求，为实验室构建持久稳定的洁净体系。

05 选择爱津 选择品质

维持无DNase/RNase环境，是确保分子生物学实验结果可靠的基础。这不仅依赖于实验人员的规范意识，更需要通过可靠的实验耗材予以保障。