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细胞不贴壁?可能是因为这些

浏览数量: 0     作者: 本站编辑     发布时间: 2024-05-15      来源: 本站

细胞不贴壁?可能是因为这些

在细胞实验中,细胞不贴壁是一个常见且令人困扰的问题,它往往会给实验带来诸多不便,影响实验进行和结果的准确性。当遇到细胞不贴壁的情况时,我们可以从以下几个方面入手,排查不贴壁的原因并找寻相对应的解决方案。


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▲贴壁细胞培养


01 细胞不贴壁的原因及解决方法


胰蛋白酶消化过度


胰酶处理时间过长,可能导致细胞膜蛋白受损,影响细胞贴壁;

解决方法:调整消化时间,缩短胰蛋白酶消化时间或降低其浓度,以减少细胞膜蛋白受损。


微生物污染


支原体感染或其他微生物污染会导致细胞功能紊乱,影响贴壁能力;

解决方法:分离培养物,检测支原体。如果发现支原体污染,应丢弃培养物。

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培养基pH值过碱


培养基pH值过高,可能导致细胞不适应,影响贴壁;

解决方法:使用无菌醋酸溶液,调整pH值或充入无菌CO₂以维持适宜的pH环境。


细胞老化


细胞传代次数过多,可能会导致细胞老化,失去贴附性;

解决方法:复苏新的细胞,使用20%血清帮助细胞复原并注意传代接种的细胞密度和时机。


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接种细胞起始浓度不当

细胞接种量过低或过高,可能无法形成有效的细胞外基质,影响贴壁;

解决方法:改变培养液成分,使用含有促贴壁因子的培养基。


02 如何判断细胞是否受污染

看培养基的浊度和颜色变化


细菌和真菌污染通常会导致培养基迅速变浑浊,颜色也会发生变化。


镜下观察


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用细胞间配置的显微镜可以观察到细菌和真菌的结构,有助于早期发现微生物污染。


培养基中的异味


某些微生物污染会产生易察觉的特殊气味,这可以帮助检测污染。


03 注意事项


在细胞培养过程中,必须严格遵循无菌操作技术,以防细胞遭受污染。要使用新鲜且质量达标的培养基及细胞株,以此来降低污染出现的可能性。还需要定期对细胞状态进行检查,如有需要,应及时对细胞进行传代或处理异常细胞。


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